皮膚變tai反應(致敏)試驗儀(yi) 準確可靠 皮膚變tai反應(致敏)試驗儀(yi) 準確可靠
皮膚bian態反應(致敏)試驗儀(yi) 實驗目的:
確定重複接觸受試物對哺乳動物是否可引起皮膚bian態反應及其程度。
皮膚bian態反應(致敏)試驗儀(yi) 試驗概述:
局部封閉塗皮試驗(Buehler test,BT)和豚鼠最大值試驗(uinea pig maximisation test,GPMT)是實驗動物通過多次皮膚塗抹(誘導接觸)或皮內(nei) 注射受試物10d~14d(誘導階段)後,給予激發劑量的受試物,觀察實驗動物,並與(yu) 對照動物比較對激發接觸受試物的皮膚反應強度。
小鼠局部淋巴結分析試驗(locallymph node assay,LLNA)是通過耳部給予實驗動物受試物,引起淋巴結的淋巴細胞增生,淋巴細胞增生與(yu) 受試物劑量(過敏程度)成比例。利用放射性標記方法,測定試驗組與(yu) 對照組淋巴細胞的標記率,並進行對比,獲得刺激指數,評價(jia) 致敏強度。
皮膚bian態反應(致敏)試驗儀(yi) 應用範圍:
應用於(yu) 科研、農(nong) 業(ye) 、衛生、教育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等各個(ge) 領域。
符合標準:
GB/T 15670.9-2017《農(nong) 藥登記毒理學試驗方法第9部分皮膚bian態反應(致敏)試驗》
試驗步驟:
1. Buehler Test(BT)
(1)動物模型:豚鼠
(2)操作步驟:
誘導階段:通過封閉式皮膚塗抹受試物,持續10-14天。
激發階段:間隔後再次塗抹受試物,觀察皮膚反應。
(3)觀察指標:紅斑、水腫等皮膚炎症反應的強度(主觀評分)
(4)優(you) 點:模擬人類皮膚接觸途徑,適用於(yu) 局部製劑(如化妝品、外用藥物);無需注射,操作相對溫和。
(5)缺點:敏感性較低,可能漏檢弱致敏物。依賴主觀評分,存在實驗者偏差。
(6)應用場景:傳(chuan) 統化妝品、外用藥品的安全性評估。
2.豚鼠最大值試驗(GPMT)
(1)動物模型:豚鼠
(2)操作步驟:
誘導階段:皮內(nei) 注射受試物(常聯合弗氏wan全佐劑)結合皮膚塗抹,持續10-14天。
激發階段:再次塗抹受試物,評估皮膚反應。
(3)觀察指標:與(yu) BT類似,但反應更強烈(紅斑、水腫、硬結)
(4)優(you) 點:敏感性高,可檢測強致敏物和弱致敏物;國際gong認的“金標準",尤其適用於(yu) 化學品和工業(ye) 原料。
(5)缺點:使用佐劑可能引發過度免疫反應,導致假陽性;動物痛苦程度較高,倫(lun) 理爭(zheng) 議較大。
(6)應用場景:工業(ye) 化學品、強致敏性物質(如染發劑、橡膠添加劑)的嚴(yan) 格檢測。
3.小鼠局部淋巴結試驗(LLNA)
(1)動物模型:小鼠.
(2)操作步驟:
誘導階段:連續3天耳部塗抹受試物。
(3)檢測指標:通過3H-胸苷或BrdU標記增殖的淋巴細胞,計算刺激指數(SI)觀察指標:淋巴結淋巴細胞增殖程度(SI>3判為(wei) 陽性)
(4)優(you) 點:客觀定量:減少主觀評分誤差;符合3R原則:動物用量少,無需激發階段,痛苦小;高效快速:試驗周期短(約1周)。
(5)缺點:對某些物質(如金屬鹽)敏感性不足,需使用放射性物質或特殊設備,成本較高。
(6)應用場景:歐盟等法規優(you) 先推薦的替代方法,廣泛用於(yu) 藥品、化妝品及化工產(chan) 品的初篩。