體(ti) 外哺乳動物細胞染色體(ti) 畸變試驗儀(yi) 準確 體(ti) 外哺乳動物細胞染色體(ti) 畸變試驗儀(yi) 準確
體(ti) 外哺乳動物細胞染色體(ti) 畸變試驗儀(yi) 實驗目的：
本試驗檢測受試物是否引起培養(yang) 的哺乳動物細胞染色體(ti) 畸變,以評價(jia) 受試物致突變的可能性。
體(ti) 外哺乳動物細胞染色體(ti) 畸變試驗儀(yi) 實驗概述：
在加入和不加入代謝活化係統的條件下,使培養(yang) 的哺乳動物細胞暴露於(yu) 受試物中。用中期分裂相阻斷劑（如秋水仙素或秋水仙胺）處理,使細胞停止在中期分裂相,隨後收獲細胞,製片,染色,分析染色體(ti) 畸變。
大部分的致突變劑導致染色單體(ti) 型畸變,偶有染色體(ti) 型畸變發生。雖然多倍體(ti) 的增加可能預示著有染色體(ti) 數目畸變的可能,但本方法並不適合用於(yu) 測定染色體(ti) 的數目畸變。
體(ti) 外哺乳動物細胞染色體(ti) 畸變試驗儀(yi) 應用範圍：
應用於(yu) 科研、農(nong) 業(ye) 、衛生、教育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等各個(ge) 領域。
符合標準：
GB/T 15670.19-2017《農(nong) 藥登記毒理學試驗方法第19部分:體(ti) 外哺乳動物細胞染色體(ti) 畸變試驗》
試驗流程：
1）細胞培養(yang)
選擇合適細胞係，在含血清培養(yang) 基中培養(yang) 至對數生長期。
2）受試物處理
設置多個(ge) 濃度組（需包括細胞毒性評估，如50%生長抑製濃度）
陽性對照（如si裂黴素C、huan磷酰胺等已知誘變劑）
陰性對照（溶劑對照）
3.）代謝活化係統（S9混合液）
模擬體(ti) 內(nei) 代謝，用於(yu) 檢測需代謝激活的致突變物（如加Aroclor 1254誘導的大鼠肝S9）
4.）采樣時間
短期處理:1個(ge) 細胞周期（通常24小時，含或不含S9）
長期處理:覆蓋多個(ge) 細胞周期（如48小時）
5）染色體(ti) 製備
秋水仙素（或秋水仙胺）處理:阻斷中期細胞。
低滲處理（KCI溶液）使細胞膨脹。
固定（甲醇:冰醋酸=3:1）後滴片，Giemsa染色。
6）鏡檢分析
顯微鏡下觀察至少200個(ge) 中期分裂相，記錄畸變類型和頻率。
儀(yi) 器與(yu) 試劑
關(guan) 鍵儀(yi) 器：
培養(yang) 箱、生物安全櫃、離心機、顯微鏡（配備油鏡和圖像分析係統）
染色體(ti) 自動掃描儀(yi) （可選）
主要試劑:
細胞培養(yang) 基、胎牛血清、胰dan白酶。
秋水仙素、Giemsa染液、S9混合液。
