體(ti) 外哺乳動物細胞基因突變試驗儀(yi) 操作簡單 體(ti) 外哺乳動物細胞基因突變試驗儀(yi) 操作簡單
體(ti) 外哺乳動物細胞基因突變試驗儀(yi) 實驗目的：
本試驗用於(yu) 檢測受試物對體(ti) 外培養(yang) 的哺乳動物細胞的基因突變作用,包括堿基對突變、移碼突變和缺失等,從(cong) 而評價(jia) 受試物引起突變的可能性。
體(ti) 外哺乳動物細胞基因突變試驗儀(yi) 實驗概述：
本試驗屬正向突變試驗,可檢出堿基置換型致突變物和移碼型致突變物。在加入和不加入代謝活化係統的條件下,使細胞暴露於(yu) 受試物一定時間,然後將細胞傳(chuan) 代培養(yang) 。胸苷激酶水平正常的細胞對san氟胸苷（trifluorothymidine,TFT）等敏感,因而在培養(yang) 液中不能生長分裂,突變細胞則不敏感,在含有san氟胸苷的選擇性培養(yang) 液中能繼續分裂並形成集落。相似的,次黃嘌ling鳥嘌ling磷酸核糖基酶(HPRT)正常的細胞對 6-硫代鳥嘌ling（6-thioguanine,6-TG）敏感,突變的細胞則不敏感,在含有 6-硫代鳥嘌ling的選擇性培養(yang) 液中可生長形成集落。基於(yu) 突變集落數,計算突變頻率以評價(jia) 受試物的致突變性。
體(ti) 外哺乳動物細胞基因突變試驗儀(yi) 應用範圍
應用於(yu) 科研、農(nong) 業(ye) 、衛生、教育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等各個(ge) 領域。
符合標準：
GB/T 15670.20-2017《農(nong) 藥登記毒理學試驗方法第20部分:體(ti) 外哺乳動物細胞基因突變試驗》
試驗流程
1）細胞培養(yang) :
選擇合適細胞係（如L5178Y、CHO），常規傳(chuan) 代培養(yang)
2）受試物處理:
暴露於(yu) 不同濃度受試物（需設陰性/陽性對照）
3）表達期:
預留足夠時間（通常7-10天）使突變表型顯現。
4.）突變體(ti) 篩選:
TK試驗:使用san氟胸苷（TFT）篩選TK突變體(ti) 。
HPRT試驗:使用6-硫代鳥嘌ling（6-TG）選HPRT突變體(ti) 。
5）克隆形成分析:
計數突變集落，計算突變頻率（突變集落數/存活細胞數）
6）數據統計:
與(yu) 對照組比較，判斷突變率是否顯著增加。
注意事項
1）細胞活力控製:受試物濃度需保證細胞存活率（通常>50%）
2）代謝活化係統:需加入S9混合物(模擬體(ti) 內(nei) 代謝，（如Aroclor 1254誘導的大鼠肝S9）。
3）假陽性/陰性:避免pH、滲透壓等非特異性因素幹擾。
4）合規性: 遵循國際指南（如OECD 490、ICH S2R1）。
計算：
