體(ti) 內(nei) 哺乳動物骨髓細胞染色體(ti) 畸變試驗儀(yi) 準確 體(ti) 內(nei) 哺乳動物骨髓細胞染色體(ti) 畸變試驗儀(yi) 準確
體(ti) 內(nei) 哺乳動物骨髓細胞染色體(ti) 畸變試驗儀(yi) 實驗目的:
檢測受試物是否引起哺乳動物骨髓細胞染色體(ti) 畸變,以評價(jia) 受試物致突變的可能性。
體(ti) 內(nei) 哺乳動物骨髓細胞染色體(ti) 畸變試驗儀(yi) 實驗概述:
染色體(ti) 是細胞核中具有特殊結構和遺傳(chuan) 功能的小體(ti) ,當化學物質作用於(yu) 細胞周期G1期和S期時誘發染色體(ti) 型畸變,而作用於(yu) G2期時則誘發染色單體(ti) 型畸變。給試驗的大、小鼠腹腔注入秋水仙素抑製細胞分裂時紡錘絲(si) 的形成,以增加中期分裂相細胞的比例,並使染色體(ti) 絲(si) 縮短、分散、輪廓清晰。在顯微鏡下觀察染色體(ti) 數目和形態。本方法特別適用於(yu) 需考慮體(ti) 內(nei) 代謝活化後的染色體(ti) 畸變分析。若有證據表明受試物或其代謝產(chan) 物不能到達骨髓,則不適用於(yu) 本方法。
體(ti) 內(nei) 哺乳動物骨髓細胞染色體(ti) 畸變試驗儀(yi) 應用範圍
應用於(yu) 科研、農(nong) 業(ye) 、衛生、教育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等各個(ge) 領域。
符合標準:
GB/T 15670.16-2017《農(nong) 藥登記毒理學試驗方法第16部分:體(ti) 內(nei) 哺乳動物骨髓細胞染色體(ti) 畸變試驗》
試驗流程
1.動物選擇:常用齧齒類動物(大鼠或小鼠),通常每組至少5隻/性別。
2.給藥方案:
單次給藥:通常在采樣前12-48小時給藥(覆蓋細胞周期)
多次給藥:若受試物代謝或毒性需重複暴露。
3.陽性對照:已知致畸變劑(如huan磷酰胺)
4.陰性對照:溶劑對照(如生理鹽水或DMSO)
5.采樣時間:通常在給藥後24小時和48小時采集骨髓細胞(覆蓋不同細胞周期階段)
6.染色體(ti) 製備:
處死動物後取出骨髓細胞。
用秋水仙素(Colchicine)處理,阻斷細胞分裂於(yu) 中期。低滲處理、固定、製片並染色(如Giemsa染色)
7.鏡檢分析:
觀察至少200個(ge) 中期分裂相/動物,記錄畸變類型和頻率,
區分染色體(ti) 型畸變(如雙著絲(si) 粒體(ti) )和染色單體(ti) 型畸變(如斷裂)
結果判定
1)劑量相關(guan) 性:畸變率隨劑量增加而升高。
2)統計學差異:試驗組畸變率顯著高於(yu) 陰性對照組(如p<0.05)
3)生物學意義(yi) :需結合曆史對照數據和畸變類型綜合評估。